Kemiluminiscencijski imunotest, CLIA je vrlo osjetljiva tehnika imunološkog testa.
1. Načelo
Kemiluminiscencijski imunotest kombinira specifičnost imunološkog odgovora i visoku osjetljivost kemiluminiscencije. Njegovo osnovno načelo je kombinacija specifičnog imunološkog odgovora između antigena i antitijela s reakcijom kemiluminiscencije. Točnije, antigen u uzorku koji se testira spaja se sa specifičnim antitijelom kako bi se formirao imunološki kompleks. Zatim, nizom kemijskih reakcija, imunološki kompleks proizvodi kemiluminiscentni signal. Intenzitet luminescencije proporcionalan je koncentraciji antigena koji se testira, a sadržaj antigena koji se testira može se kvantitativno analizirati detekcijom intenziteta luminescencije.
2. Glavne komponente
Protutijela: uključujući antitijela za hvatanje i antitijela za otkrivanje. Antitijelo za hvatanje obično se fiksira na nosač čvrste faze kako bi se uhvatio antigen koji se testira. Antitijelo za otkrivanje kombinira se s kemiluminiscentnim markerom za otkrivanje antigena u imunološkom kompleksu.
Nosač krute faze: poput mikropločica, magnetskih kuglica, itd., koji se koriste za fiksiranje antitijela za hvatanje kako bi se olakšala imunološka reakcija te odvajanje i pranje.
Kemiluminescentni marker: obično tvar koja može proizvesti luminescentni signal u kemijskoj reakciji, kao što je luminol, akridinijev ester, itd. Marker se kombinira s antitijelom za otkrivanje kako bi proizveo kemiluminiscentni signal nakon imunološke reakcije.
Sustav detekcije: uključujući opremu kao što su detektori luminescencije, koji se koriste za detekciju intenziteta kemiluminiscentnih signala i njihovo pretvaranje u čitljive vrijednosti.
3. Značajke
Visoka osjetljivost: Može detektirati iznimno niske koncentracije ispitivane tvari, što je obično nekoliko redova veličine osjetljivije od tradicionalnih metoda imunotestiranja.
Široko linearno područje: Sadržaj ispitivane tvari može se točno izmjeriti u širokom rasponu koncentracija bez višestrukih razrjeđivanja.
Jaka specifičnost: Na temelju specifičnog vezanja antigena i protutijela, vrlo je selektivan za specifične ispitivane tvari.
Brzo: Proces otkrivanja je relativno brz i rezultati se općenito mogu dobiti u kraćem vremenu.
Visok stupanj automatizacije: Pogodan je za detekciju velikih uzoraka i može se koristiti u kombinaciji s automatiziranim instrumentima za poboljšanje učinkovitosti detekcije.
4. Područja primjene
Klinička dijagnoza: Koristi se za otkrivanje različitih biomarkera, kao što su tumorski markeri, hormoni, markeri zaraznih bolesti itd., kako bi se pružila važna osnova za dijagnozu bolesti, praćenje liječenja i procjenu prognoze.
Razvoj lijekova: Koristi se za praćenje koncentracije lijekova, procjenu učinkovitosti i istraživanje metabolizma lijekova.
Ispitivanje sigurnosti hrane: Detekcija štetnih tvari, ostataka pesticida, ostataka veterinarskih lijekova itd. u hrani.
Praćenje okoliša: Detekcija zagađivača i otrovnih tvari u okolišu.